重組肝素酶Ⅰ熱失活動力學模型的建立與應用
發布時間：2015-09-07
【作者】 程詠梅； 陳潮梁； 陳敬華； 劉衛超； 周斌； 宋志新；
工業微生物 , Industrial Microbiology,
2014年02期
【機構】 江南大學藥學院； 常山生化藥業(江蘇)有限公司；
【摘要】 對組氨酸標簽肝素酶I（His-Hep I,EC 4.2.2.7）的熱失活機制進行了研究。針對短暫低溫處理可以使熱失活His-Hep I酶活部分恢復及添加二硫蘇糖醇（DTr）使其熱穩定性提高的現象,利用熒光探針法研究了失活過程His-Hep I構象變化,證明了該酶構象存在可逆轉變行為。為進一步明晰His-Hep I的熱失活機制,假設該酶熱失活的主要途徑包括去折疊及形成聚集體,并以此為基礎建立模型進行擬合,模型與實驗值吻合良好,表明假設的合理性。根據模型計算的活化能為Er=100.217 kJ/mol、Eir=7.857 kJ/mol和Ed=77.062 kJ/mol,此數據從一定程度上解釋了冷處理為何能使His—Hep I部分恢復活性。進一步研究表明,任何能夠抑制這兩種途徑發生的措施對于提高His-Hep I熱穩定性都是有效的。